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O uso de nanopartículas (NPs) e de enzimas no desenvolvimento de sensores eletroquímicos tem se intensificado, visando a determinação de analitos de interesse farmacológico e biológico. Os sensores preparados apresentam uma maior sensibilidade, melhor eletrocatálise e limites de detecção mais baixos em relação aos eletrodos sem modificação. As NPs propiciam um aumento de área superficial, que possibilita um maior acesso aos sítios eletroativos na superfície dos eletrodos dos analitos estudados (passíveis de oxidação ou redução). Neste sentido, novos sensores nanoestruturados foram preparados a partir de hidróxidos duplos de níquel e de enzimas.Os eletrodos modificados com os hidróxidos bi e trimetálicos de níquel foram preparados e seu comportamento caracterizado eletroquimicamente. A modificação dos eletrodos baseada em NPs e/ou enzimas mostrou-se eficiente para determinação de diversos analitos(hidralazina, ácido úrico, acetaminofeno, peróxido de hidrogênio, glicose e lactato), especialmente em meio biológico. Os eletrodos foram avaliados via métodos voltamétricos e amperométricos associados à análise por injeção em batelada, sendo possível trabalhar em condições mais favoráveis.