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Además de los anticuerpos convencionales, los camélidos poseen anticuerpos carentes de cadena liviana en los que un único dominio forma el sitio de unión al antígeno. Este dominio, denominado Nanobody o VHH, es uno de los fragmentos de reconocimiento de antígeno más pequeños conocidos en la naturaleza (~15 kDa) y se caracterizan por su alta estabilidad, solubilidad y especificidad. Estas características únicas de los VHHs junto a su facilidad de manipulación mediante biología molecular convierten a los VHH en una prometedora alternativa a los anticuerpos convencionales o fragmentos de anticuerpo para numerosas aplicaciones biotecnológicas. Este trabajo de tesis tuvo como horizonte establecer tecnología local para la generación de bibliotecas de nanobodies en fagos filamentosos a partir de linfocitos B de llamas (Lama glama). Asimismo se desarrollaron metodologías que facilitan la selección y caracterización de los nanobodies de interés contra una variedad de antígenos que van desde pequeñas moléculas hasta complejas estructuras celulares. La funcionalidad de los nanobodies seleccionados se demostró en diferentes aplicaciones biotecnológicas.