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A investigação experimental atual é dedicada à preparação de microesferas com dimensões reduzidas e boa esfericidade pelo método de separação de fases, utilizando a isoniazida (INH) como fármaco modelo. A fibroína de seda tem qualidades intrínsecas únicas, como a biodegradabilidade, a biocompatibilidade ou as propriedades de libertação e a sua capacidade de carga de fármaco ajustável. A capacidade de carga das moléculas de fármaco nas esferas de seda depende da sua carga e hidrofobicidade ou do subsequente perfil de libertação do fármaco alterado. No presente trabalho, a microesfera de fibroína de seda carregada com isoniazida foi preparada utilizando o método de separação de fases. A microesfera foi avaliada por espetroscopia de ultravioleta-visível, espetroscopia de infravermelhos com transformada de Fourier, eficiência de aprisionamento, estudos de microscopia eletrónica de varrimento. Os estudos de microscopia eletrónica de varrimento revelaram que as microesferas de fibroína de seda carregadas com isoniazida eram esféricas. O relatório experimental revelou um novo método de formulação à base de água para esferas de seda com forma ou tamanho e esfera controláveis. As microesferas de seda carregadas com isoniazida podem atuar como nanoformulação ideal com estudos elaborados.