Sviluppo di un saggio di screening ad alta produttività
Per il rilevamento delle vie di segnalazione mediate da E2F
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Gli E2F sono fattori di trascrizione che regolano il ciclo cellulare con un meccanismo diverso. La famiglia E2F contiene otto membri E2F1 - E2F8 e l'interruzione delle vie di segnalazione di E2F è una delle cause dello sviluppo del cancro. La parte teorica riassume le informazioni di base su E2F, la proteina retinoblastoma, il ciclo cellulare e il suo controllo. Si concentra anche sui modi in cui la morte cellulare - l'apoptosi - può essere mediata da E2Fs. La parte sperimentale è incentrata sul test di tre cloni della linea cellulare 293H trasfettati con il costrutto E2F-luciferasi. I clon...
Gli E2F sono fattori di trascrizione che regolano il ciclo cellulare con un meccanismo diverso. La famiglia E2F contiene otto membri E2F1 - E2F8 e l'interruzione delle vie di segnalazione di E2F è una delle cause dello sviluppo del cancro. La parte teorica riassume le informazioni di base su E2F, la proteina retinoblastoma, il ciclo cellulare e il suo controllo. Si concentra anche sui modi in cui la morte cellulare - l'apoptosi - può essere mediata da E2Fs. La parte sperimentale è incentrata sul test di tre cloni della linea cellulare 293H trasfettati con il costrutto E2F-luciferasi. I cloni con le migliori proprietà sono stati selezionati per lo sviluppo e la validazione di saggi omogenei di screening ad alta velocità in grado di rilevare l'espressione dei geni mediati da E2F. Con questo set up i saggi sono stati validati su composti biologicamente attivi della libreria LOPAC. I risultati riassunti nelle conclusioni valutano il ruolo dell'attivazione o della repressione di E2F in relazione alla sopravvivenza cellulare.
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