Protocole efficace de purification de l'ADN pour la prise d'empreintes digitales de la canne à sucre
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La canne à sucre (Saccharum officinarum L.) est l'une des principales cultures au monde. La caractérisation moléculaire et la sélection assistée par marqueurs moléculaires dans la sélection de la canne à sucre pourraient être un outil d'amélioration de cette culture et contribuer à l'augmentation de la production de sucre. Comme de nombreuses autres espèces végétales, les tissus de la canne à sucre contiennent des niveaux élevés de polysaccharides et de composés polyphénoliques, qui présentent un problème majeur de contamination lors de la purification de l'ADN. De fortes ...
La canne à sucre (Saccharum officinarum L.) est l'une des principales cultures au monde. La caractérisation moléculaire et la sélection assistée par marqueurs moléculaires dans la sélection de la canne à sucre pourraient être un outil d'amélioration de cette culture et contribuer à l'augmentation de la production de sucre. Comme de nombreuses autres espèces végétales, les tissus de la canne à sucre contiennent des niveaux élevés de polysaccharides et de composés polyphénoliques, qui présentent un problème majeur de contamination lors de la purification de l'ADN. De fortes concentrations de polysaccharides, qui se co-purifient avec l'ADN dans les extractions normales phénol-chloroforme et les polyphénols se lient par covalence à l'ADN, le rendant inutile pour la plupart des applications de recherche. Une procédure de purification de l'ADN rapide, efficace et facile pour la canne à sucre est un besoin urgent dans les programmes de cartographie du génome et de sélection assistée par marqueurs (SAM). Dans le cadre de la présente étude, une méthode efficace et facile a été mise au point pour isoler l'ADN de haute qualité du cylindre méristémique de la canne à sucre. Grâce à cette méthode, il a été possible d'isoler de l'ADN de haute qualité sans utiliser d'azote liquide, d'homogénéisateur de tissus et en utilisant une simple micro-centrifugeuse. L'ADN isolé a bien fonctionné pour l'amplification par PCR et la prise d'empreintes génétiques à l'aide de marqueurs RAPD.
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