Méthodes et techniques d''évaluation de l''activité des antiviraux
Evaluation par PCR de l''activité antivirale des inhibiteurs de l''ADN polymérase du virus d''Epstein-Barr
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Un système d'évaluation in vitro de l'activité de médicaments anti-EBV a été mis au point en utilisant la PCR/RT-PCR quantitative en temps réel. Trois composés appartenant à différentes classes antivirales ont été testés: un analogue nucléosidique, le ganciclovir (GCV), un analogue nucléotidique, le cidofovir (HPMPC), et un analogue du pyrophosphate, le foscarnet (PFA). Après 7 jours de traitement des cellules P3HR-1 productrices de virions, les concentrations inhibant de 50 % la réplication de l'ADN viral sont respectivement de 0.28 µg/mL, 0.29 µg/mL et 13.6 µg/mL pour le ...
Un système d'évaluation in vitro de l'activité de médicaments anti-EBV a été mis au point en utilisant la PCR/RT-PCR quantitative en temps réel. Trois composés appartenant à différentes classes antivirales ont été testés: un analogue nucléosidique, le ganciclovir (GCV), un analogue nucléotidique, le cidofovir (HPMPC), et un analogue du pyrophosphate, le foscarnet (PFA). Après 7 jours de traitement des cellules P3HR-1 productrices de virions, les concentrations inhibant de 50 % la réplication de l'ADN viral sont respectivement de 0.28 µg/mL, 0.29 µg/mL et 13.6 µg/mL pour le GCV, le HPMPC et le PFA. L'expression de l'ARNm de la glycoprotéine tardive gp350/220 est réduite de 79 à 89 % après 4 jours. Nous avons aussi démontré la spécificité de l'effet antiviral en mesurant les taux d'ADN (b-globine) ou d'ARN (hPBGD) cellulaires. En conclusion, notre système permet l'évaluation de l'effet antiviral contre l'EBV de façon quantitative, simple et précise.
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