L'édition du génome avec le système CRISPR Cas9
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L'ingénierie des génomes est à l'aube de son âge d'or. De nouveaux outils passionnants apparaissent et s'ajoutent à son arsenal. Après les TALEN et les Zing-finger, un nouvel outil digne d'intérêt vient s'ajouter. Il s'agit du système CRISPR. Ce système a été découvert pour la première fois chez le Streptococcus thermophilus et son rôle naturel est l'immunité adaptative spécifique à la séquence contre l'ADN étranger dans les bactéries. Dans le présent rapport, le système CRISPR Cas9, de type II, est utilisé pour tenter d'éliminer le gène HPRT1 exprimé dans les lympho...
L'ingénierie des génomes est à l'aube de son âge d'or. De nouveaux outils passionnants apparaissent et s'ajoutent à son arsenal. Après les TALEN et les Zing-finger, un nouvel outil digne d'intérêt vient s'ajouter. Il s'agit du système CRISPR. Ce système a été découvert pour la première fois chez le Streptococcus thermophilus et son rôle naturel est l'immunité adaptative spécifique à la séquence contre l'ADN étranger dans les bactéries. Dans le présent rapport, le système CRISPR Cas9, de type II, est utilisé pour tenter d'éliminer le gène HPRT1 exprimé dans les lymphocytes, à titre de preuve de concept. Le milieu HAT combiné à la thioguanine est utilisé comme milieu de sélection, ce qui permet une méthode de criblage rapide et simple. Pour vérifier que l'édition a bien eu lieu dans les cellules de mammifères, un kit de détection du clivage de l'ADN est utilisé en combinaison avec un test enzymatique.
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