Isolierung und Amplifikation des ¿-Lactamage-Gens aus S. Aureus
Gen und Staphylococcus Aureus
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Das klinische Isolat von S. aureus, das eine Resistenz gegen Ampicillin aufweist, wurde in der vorliegenden Studie für die Isolierung und Amplifikation des ß-Lactamase-Gens ausgewählt, das erfolgreich aus chromosomaler DNA mit Hilfe von Primern amplifiziert wurde, die aus dem Klasse (A) ß-Lactamase-Gen von M. tuberculosis H37Rv konstruiert wurden. Das PCR-Produkt wurde in die SmaI-Stelle des Vektors M13 mp18 kloniert, und der positive Klon wurde mit 100 µg/ml Ampicillin selektiert. Anschließend wurde die DNA des Klons isoliert und mit denselben Primern auf das Insert überprüft. Das PCR...
Das klinische Isolat von S. aureus, das eine Resistenz gegen Ampicillin aufweist, wurde in der vorliegenden Studie für die Isolierung und Amplifikation des ß-Lactamase-Gens ausgewählt, das erfolgreich aus chromosomaler DNA mit Hilfe von Primern amplifiziert wurde, die aus dem Klasse (A) ß-Lactamase-Gen von M. tuberculosis H37Rv konstruiert wurden. Das PCR-Produkt wurde in die SmaI-Stelle des Vektors M13 mp18 kloniert, und der positive Klon wurde mit 100 µg/ml Ampicillin selektiert. Anschließend wurde die DNA des Klons isoliert und mit denselben Primern auf das Insert überprüft. Das PCR-Produkt (0,7 Kb) zeigte an, dass die Klonierung erfolgreich war, was auch bestätigte, dass ß-Lactamase, die eine Resistenz gegen Ampicillin und andere ß-Lactam-Antibiotika verleiht, auf der chromosomalen DNA von S. aurues vorhanden war.
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