Entwicklung eines Hochdurchsatz-Screening-Tests
Zum Nachweis von E2F-vermittelten Signalwegen
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E2Fs sind Transkriptionsfaktoren, die den Zellzyklus über einen anderen Mechanismus regulieren. Die E2F-Familie umfasst acht Mitglieder (E2F1 - E2F8), und die Störung der E2F-Signalwege ist einer der Gründe für die Entstehung von Krebs. Der theoretische Teil fasst grundlegende Informationen über E2Fs, das Retinoblastom-Protein, den Zellzyklus und seine Kontrolle zusammen. Er befasst sich auch mit der Art und Weise, wie der Zelltod - die Apoptose - durch E2Fs vermittelt werden kann. Der experimentelle Teil konzentriert sich auf das Testen von drei Klonen der Zelllinie 293H, die mit einem E...
E2Fs sind Transkriptionsfaktoren, die den Zellzyklus über einen anderen Mechanismus regulieren. Die E2F-Familie umfasst acht Mitglieder (E2F1 - E2F8), und die Störung der E2F-Signalwege ist einer der Gründe für die Entstehung von Krebs. Der theoretische Teil fasst grundlegende Informationen über E2Fs, das Retinoblastom-Protein, den Zellzyklus und seine Kontrolle zusammen. Er befasst sich auch mit der Art und Weise, wie der Zelltod - die Apoptose - durch E2Fs vermittelt werden kann. Der experimentelle Teil konzentriert sich auf das Testen von drei Klonen der Zelllinie 293H, die mit einem E2F-Luciferase-Konstrukt transfiziert wurden. Die Klone mit den besten Eigenschaften wurden für die Entwicklung und Validierung von homogenen Hochdurchsatz-Screening-Assays ausgewählt, mit denen die E2F-vermittelte Genexpression nachgewiesen werden kann. Die Assays wurden an biologisch aktiven Verbindungen aus der LOPAC-Bibliothek validiert. Die in der Schlussfolgerung zusammengefassten Ergebnissebewerten die Rolle der Aktivierung oder Unterdrückung von E2F in Bezug auf das Zellüberleben.
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