Ensaio de fusão de alta resolução para deteção de infecções bacterianas por DST
Desenvolvimento de um ensaio multiplex RT-PCR e HRM
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O presente estudo foi realizado para detetar agentes infecciosos sexualmente transmissíveis (bactérias e vírus) através do desenvolvimento do ensaio HRM (fusão de alta resolução) com PCR multiplex em tempo real utilizando um conjunto de primers de cada agente patogénico que foi designado por um programa de software profissional (Beacon Designer(TM) automatiza a conceção de primers e sondas em tempo real) para a deteção precisa destas infecções em doentes iraquianos. Este estudo conduziu à deteção de sete agentes patogénicos sexualmente transmissíveis diferentes (3 bactérias...
O presente estudo foi realizado para detetar agentes infecciosos sexualmente transmissíveis (bactérias e vírus) através do desenvolvimento do ensaio HRM (fusão de alta resolução) com PCR multiplex em tempo real utilizando um conjunto de primers de cada agente patogénico que foi designado por um programa de software profissional (Beacon Designer(TM) automatiza a conceção de primers e sondas em tempo real) para a deteção precisa destas infecções em doentes iraquianos. Este estudo conduziu à deteção de sete agentes patogénicos sexualmente transmissíveis diferentes (3 bactérias, 3 vírus e um parasita) entre 150 pacientes suspeitos de serem casais. Os resultados da RT-PCR com ensaio HRM dos controlos positivos demonstraram diferentes curvas de fusão, em que cada pico de fusão representa a amlificação de um dos sete agentes patogénicos, bem como o pico de fusão do controlo interno (gene de manutenção da casa). Este experimento incluiu três painéis, o painel um representa o pico de fusão ideal para o controle positivo de Trichomonas vaginalis, Mycoplasma hominis, Cytomegalovirus, a temperatura de fusão de cada um deles foi de 80,0 ¿, 84,90 ¿ e 88,0 ¿, respetivamente.
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