Edición del genoma con el sistema CRISPR Cas9
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La ingeniería genómica está a punto de alcanzar su edad de oro. Están surgiendo nuevas y emocionantes herramientas que se acumulan en su arsenal. Después de los TALEN y los Zing-finger, una nueva y valiosa herramienta viene a sumarse. Se trata del sistema CRISPR. Un sistema que se descubrió por primera vez en el Streptococcus thermophilus y su función natural es la inmunidad adaptativa secuencia-específica contra el ADN extraño en las bacterias. En el presente informe, el sistema CRISPR Cas9, tipo II, se utiliza en un intento de eliminar el gen HPRT1 expresado en linfocitos como prueb...
La ingeniería genómica está a punto de alcanzar su edad de oro. Están surgiendo nuevas y emocionantes herramientas que se acumulan en su arsenal. Después de los TALEN y los Zing-finger, una nueva y valiosa herramienta viene a sumarse. Se trata del sistema CRISPR. Un sistema que se descubrió por primera vez en el Streptococcus thermophilus y su función natural es la inmunidad adaptativa secuencia-específica contra el ADN extraño en las bacterias. En el presente informe, el sistema CRISPR Cas9, tipo II, se utiliza en un intento de eliminar el gen HPRT1 expresado en linfocitos como prueba de concepto. Se utiliza el medio HAT en combinación con tioguanina como medio de selección, lo que permite un método de cribado de lectura rápido y sencillo. Para verificar que la edición se ha producido con éxito en las células de mamífero, se utiliza un kit de detección de escisión del ADN en combinación con un ensayo enzimático.
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