Determinación de la fracción mutada de NPM1 en LMA mediante dPCR
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La mutación del gen NPM1 (Nucleophosmin) es una de las mutaciones adquiridas más frecuentemente observadas en la leucemia mieloide aguda (LMA). De los muchos tipos de mutaciones NPM1, la mutación de tipo A representa el 80%. El seguimiento de este marcador está indicado de forma rutinaria en el tratamiento de la LMA. Actualmente se controla mediante RT-qPCR. Los resultados se expresan como una relación "mutado/normal" de mutantes NPM1, y requieren el uso de un gen de referencia.La PCR digital es una tecnología reciente que permite la cuantificación absoluta de un evento genético raro. ...
La mutación del gen NPM1 (Nucleophosmin) es una de las mutaciones adquiridas más frecuentemente observadas en la leucemia mieloide aguda (LMA). De los muchos tipos de mutaciones NPM1, la mutación de tipo A representa el 80%. El seguimiento de este marcador está indicado de forma rutinaria en el tratamiento de la LMA. Actualmente se controla mediante RT-qPCR. Los resultados se expresan como una relación "mutado/normal" de mutantes NPM1, y requieren el uso de un gen de referencia.La PCR digital es una tecnología reciente que permite la cuantificación absoluta de un evento genético raro. Los puntos fuertes de la PCR digital son numerosos: el gen de referencia es idéntico a la diana de interés, la sensibilidad es prácticamente idéntica a la de la RT-qPCR y no es necesario utilizar ensayos con plásmidos. En este contexto, hemos desarrollado un método de PCR digital para el biomarcador NPM1 tipo A determinando los parámetros óptimos de la técnica para esta detección. En conclusión, la PCR digital parece ser una herramienta relevante para el seguimiento de la enfermedad residual.
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