
Análise ultracentrífuga dos processos de interação biomolecular
Análise da interação biofísica de proteínas e nanopartículas por ultracentrifugação analítica
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Como método absoluto em solução, a ultracentrifugação analítica (AUC) permite a análise quantitativa de macromoléculas com base na sua separação hidrodinâmica num campo centrífugo aplicado. Estas propriedades fundamentais da AUC permitem análises exaustivas de macromoléculas no seu estado nativo em condições biologicamente relevantes e podem fornecer informações sobre os seus coeficientes de sedimentação, massa, forma, coeficientes de difusão e densidade. Utilizando nanopartículas de ouro e as duas proteínas de ligação amiloide-beta 42 e BSA, é explicado um procedimen...
Como método absoluto em solução, a ultracentrifugação analítica (AUC) permite a análise quantitativa de macromoléculas com base na sua separação hidrodinâmica num campo centrífugo aplicado. Estas propriedades fundamentais da AUC permitem análises exaustivas de macromoléculas no seu estado nativo em condições biologicamente relevantes e podem fornecer informações sobre os seus coeficientes de sedimentação, massa, forma, coeficientes de difusão e densidade. Utilizando nanopartículas de ouro e as duas proteínas de ligação amiloide-beta 42 e BSA, é explicado um procedimento geralmente válido para a caraterização baseada em AUZ de nanopartículas modificadas por ligandos, com uma subsequente quantificação da sua modificação superficial pelos ligandos. Com base nos fundamentos físico-técnicos da AEC, na utilização de sistemas de deteção por absorção e fluorescência e no trabalho nos domínios da análise de proteínas e nanopartículas, são ilustradas e explicadas as amplas possibilidades de aplicação da ultracentrifugação analítica.