
Análise de fusão multiplex de alta resolução como ferramenta de diagnóstico
Identificação de genes de resistência aos carbapenemes isolados de doentes iraquianos
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O objetivo deste estudo foi desenvolver um RT-PCR multiplex com análise de fusão de alta resolução (HRM) para a deteção rápida e exacta de cinco carbapenemases com o gene 16S rRNA. Foram concebidos seis pares de primers e condições de RT-PCR de acordo com o software Beacon designer. A identificação dos genes foi efectuada através de curvas de fusão e temperaturas com Multiplex RT-PCR utilizando um reagente HRM dedicado. Este é o primeiro ensaio de deteção dos principais genes de carbapenemases num ensaio de dois tubos, permitindo a deteção simultânea de 5 dos mais importante...
O objetivo deste estudo foi desenvolver um RT-PCR multiplex com análise de fusão de alta resolução (HRM) para a deteção rápida e exacta de cinco carbapenemases com o gene 16S rRNA. Foram concebidos seis pares de primers e condições de RT-PCR de acordo com o software Beacon designer. A identificação dos genes foi efectuada através de curvas de fusão e temperaturas com Multiplex RT-PCR utilizando um reagente HRM dedicado. Este é o primeiro ensaio de deteção dos principais genes de carbapenemases num ensaio de dois tubos, permitindo a deteção simultânea de 5 dos mais importantes marcadores de resistência às cefalosporinas de 3ª geração e aos carbapenemes.