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Este trabajo se realizó a partir de aislamientos del agente causal de cinco casos clínicos autóctonos de Leptospira. Estos aislamientos se caracterizaron, mediante métodos fenotípicos convencionales y se logró su clasificación hasta el nivel de serogrupo. De ellos fue seleccionada y caracterizada microbiológica e inmunológicamente una cepa del serogrupo Ballum como candidato vacunal. Se formularon preparaciones vacunales monovalente y tetravalente a partir de esta cepa. Se evaluó la inmunogenicidad de ambas preparaciones, mediante microaglutinación y la capacidad de protección homóloga, frente al reto. Los aislamientos no mostraron crecimiento a 13ºC, ni cuando se le añadió al medio 8-azaguanina (2.25 mg/mL), mientras que todas las cepas mostraron conversión a forma esférica en presencia de cloruro de sodio (1M). La clasificación de los aislamientos permitió disponer de una cepa vacunal la cual fue utilizada en la elaboracion del inmunogeno conteniendo Icterohaemorragiae, Canicola, Pomona y Ballum cumpliendo satisfactoriamente con los controles de calidad y mostraron una significativa inmunogenicidad y capacidad de protección homologa así como eliminación del estado portador.